一、服務內容

1、溫和條件下進行蛋白抽提，BCA定量，調整蛋白濃度

2、樣品預處理：用Protein A/G Sepharose孵育

3、樣品與IP抗體進行孵育

4、洗滌Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex，并對免疫復合物進行變性處理

5、沉淀產物SDS—PAGE或者WB鑒定（目前暫無其它鑒定）

6、Western blot檢測

（1） 電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品

（2） 濕法轉�。�BLOTING：Tank Transfer）

（3） 雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）

（4） 化學發光檢測（ECL），膠片曝光，TotalLab Quant軟件讀取IOD值（可選）

7、預實驗及正式實驗服務

二、樣品要求（樣品處理及保存見附件）

1、細胞＞1×107；組織＞100mg；細菌濕重＞50mg；植物＞100mg；血清＞50ul

2、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品

三、收費標準

服務項目	收費標準￥	實驗周期
免疫共沉淀	8300/基因	3-4周
免疫共沉淀+可曝光marker	8600/基因	3-4周
ImageQuant TL讀取條帶IOD值及計算	詢 價!

四、客戶提供材料

1、新鮮或正確保存的樣品

2、目的蛋白一抗

3、陽性對照樣品（盡量提供）

4、相關文獻（可選）

五、提交給客戶結果

1、預實驗曝光結果（膠片及掃描圖），預實驗采取2個一抗稀釋度

2、正式實驗曝光結果（膠片及掃描圖）

3、完整實驗報告

4、IOD值分析報告（可選）

六、服務說明

1、待檢測樣品可以是待檢測蛋白樣品，也可以是細胞、組織等其他樣品；

2、免疫沉淀用抗體；

3、檢測用抗體；

4、特異性二抗由北京賽諾博生物技術中心提供。

七、對照設置

1、空白：無抗體，只有protein A/G

2、陰性對照：無蛋白，有抗體及protein A/G

3、陰性對照：未轉染細胞或者基因敲除樣品

4、無關空白抗體

5、蛋白裂解液上清：Input

 

應用實例